液相色谱法测定动物组织中抗生素残留量

液相色谱法测定动物组织中抗生素残留量

    液相色谱法测定动物组织中抗生素残留量采用EDTA+磷酸（1+1）-三氯乙酸提取，应用C18固定柱富集、净化，以取得较好的分离效果。然后以保留时间定性，以峰面积定量。具体检测方法如下：

样品的提取

    四环素、土霉素的提取。称取10.0g样品于100mL比色管中，加入0.01mol/L EDTA二钠-0.04mol/l磷酸（1:1）混合液30mL，摇匀，再加入50%三氯乙酸2mL，摇匀，用EDTA-磷酸混合液定容至50mL，样品液全部转移至匀浆瓶中，用组织匀浆机高速匀浆1min，匀浆液于45℃以下水浴保温15min，待静置分层后，离心10min（2500r/min），上层清液过滤，收集滤液25mL备用。用2mL甲醇润湿Sep-Pak C18柱，字啊用10ml蒸馏水置换，然后依次用5%EDTA二钠水溶液5mL、10mL蒸馏水流过。将滤液通过Sep-Pak C18柱，分4次用10mL蒸馏水冲洗，加10mL甲醇溶出，溶出液用液相色谱仪分析。

氯霉素的提取。

    称取10.0g样品于100mL比色管中，加入磷酸盐缓冲液30mL，摇匀，慢慢加入50%三氯乙酸溶液，用磷酸盐缓冲溶液定容至50mL，样品液全部转移至匀浆瓶，用组织匀浆机高速匀浆1min，室温下放置15min，过滤，收集滤液，经0.45μm滤膜再过滤，取滤液进行液相色谱分析。

    测定后，比较其峰面积，利用外标法定量。